EPC(鯉魚上皮細胞)
EPC(鯉魚上皮細胞)
一、生長特性:Adherent貼壁細胞
二、培養温度:25°C (20-30°C)
三、敏感病毒:
Infectious pancreatic necrosis virus傳染性胰腺壞死病毒
Infectious hematopoietic necrosis virus傳染性造血壞死病毒
Spring Viremia of Carp Virus鯉春病毒血症病毒
Viral hemorrhagic septicemia virus病毒性出血性敗血症病毒
Epizootic hematopoietic necrosis virus流行性造血壞死病毒
Largemouth bass virus大口黑鱸病毒
四、培養條件
該細胞系的基本培養基為ATCC制定的Eagle's Minimal Essential Medium培養基,目錄號30-2003。為製作完整的生長培養基,向基礎培養基中添加以下成分:胎牛血清,最終濃度為10%。
Eagle最低基礎培養基(Eagle's Minimal Essential Medium)簡稱MEME培養基,是一種細胞培養基,由Harry Eagle 研發,用於組織培養物中細胞的護理。本培養基配方中含有Earle's salts和非必需氨基酸、L-谷氨醯胺、丙酸鈉和碳酸氫鈉。本培養基中碳酸氫鈉含量減少(NaHCO3, 1.5 g/L),適用於5% CO2條件下培養。如果培養條件中CO2濃度高於5%,則需要增加碳酸氫鈉含量。
三、復甦
1、在20-30°C水浴中輕輕攪拌,解凍小瓶。為減少污染的可能性,請將O形圈和蓋遠離水。解凍應迅速(約2分鐘)。
2、一旦內容物解凍,立即將小瓶從水浴中取出,並通過浸泡或噴灑70%乙醇進行去污。從這一點開始的所有操作都應在嚴格的無菌條件下進行。
3、將小瓶內容物轉移到含有9.0 mL完整培養基的離心管中,並以約125 x g的速度旋轉5至10分鐘。
4、用推薦的完整培養基重新懸浮細胞顆粒(有關培養物推薦稀釋比,請參閲特定批次信息),並分配到25 cm2或75 cm2培養瓶中。在細胞恢復過程中,避免培養基鹼度過高很重要。建議在添加小瓶內容物之前,將含有完整生長培養基的培養容器置於培養箱中至少15分鐘,以使培養基達到其正常pH值(7.0至7.6)。pH值(7.0至7.6)。
五、傳代
本協議中使用的體積適用於75 cm2的燒瓶;按比例減少或增加其他尺寸培養容器的分離培養基量。
1、取出棄掉培養液
2、用不含Ca++/Mg++的Dulbecco磷酸鹽緩衝鹽水(D-PBS)或0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA溶液短暫沖洗細胞層,以去除所有含有胰蛋白酶抑制劑的微量血清。
3、向燒瓶中添加1.0至2.0 mL胰蛋白酶EDTA溶液,並在倒置顯微鏡下觀察細胞,直到細胞層分散(通常在5分鐘內)。
4、添加6.0至8.0 mL完整生長培養基,輕輕移液吸取細胞。
5、向新的培養容器中加入適當的細胞懸浮液。建議接種量為5 x 103至7 x 103活細胞/cm2。
6、在25°C下培養。我們建議將培養物的細胞濃度保持在1 x 105和2 x 105個細胞/cm2之間。
傳代率:1:4-1:6
六、凍存
添加5%(v/v)二甲基亞碸(ATCC 4-X)的完整生長培養基
培養時間:36h
-
鍛鍊腹肌最好的方法通用多篇
腹肌綜合:篇一包括腹直肌、腹外斜肌、腹內斜肌、腹橫肌。(1)仰卧卷腹轉體(空中蹬車):適合有一定腹肌練習基礎的健身愛好者,該動作可進一步提高腹部的力量和耐力,是腹肌最佳綜合性鍛鍊方法。腹外斜肌(含腹內斜肌):篇二(1)側身卷腹:側身卷腹無疑是鍛鍊腹外斜肌不錯的選擇。側卷...
-
大學聯考志願是如何正確填報(多篇)
大學聯考如何正確填寫志願篇一報考藝術類的考生經過幾個月的艱苦奮戰,校考和統考均塵埃落定,成績也已知曉。看着手中獲得的五六張甚至十幾張專業合格證書,有的考生信心滿滿,有的考生憂心忡忡。如何選擇學校、降低報考風險、被最滿意的學校錄取是考生和家長很關心的問題...
-
美滋滋類似的詞語有經典多篇
大街小巷類似詞語篇一1、大題小作2、大驚小怪3、大醇小疵4、大計小用5、大法小廉6、大街小巷7、大吆小喝8、大同小異9、大呼小叫10、大材小用11、大題小做12、大呼小喝13、大頭小尾金光閃閃類似詞語篇二1、人情洶洶:形容人心動盪不安。同“人情恟恟”。2、行色...
-
網絡技術員崗位職責(精品多篇)
網絡技術員崗位職責篇一1.負責公司網絡產品市場開拓及銷售執行。2.負責所轄人員的日常管理與培訓。3.制訂與執行銷售計劃,主持會議,組織所轄人員的激勵活動。4.負責部門各項經營績效與任務目標的`達成。5.負責所轄商務部門人員的指導和檢查。網絡技術員的崗位職...